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Warum die endogene Peroxidase-Aktivität blockieren?
Warum die endogene Peroxidase-Aktivität blockieren?
Anonim

Bei bestimmten Antigenen wie CD4 und CD8 hat die Wasserstoffperoxid-Blockierung eine nachteilige Wirkung auf die Epitope, wodurch die Intensität der Antikörperfärbung verringert wird. Daher wird eine Blockierung nach der Inkubation des primären oder sekundären Antikörpers empfohlen.

Warum die Blockierung des endogenen Enzyms bei IHC wichtig ist?

Blockierung körpereigener Enzyme

Wenn das Enzym natürlicherweise in dem zu untersuchenden Gewebe vorhanden ist, muss seine Aktivität vor dem Nachweisschritt blockiert werden Bei Verwendung von HRP zum Nachweis, Aufgrund der endogenen Peroxidase-Aktivität kann es zu einer unspezifischen oder starken Hintergrundfärbung kommen. … die AP-Aktivität in gefrorenem Gewebe höher ist.

Ist Sperrung für IHC notwendig?

Was blockiert in der Immunhistochemie? Die Blockierung ist wesentlich, um die unspezifische Bindung von Antikörpern oder anderen Reagenzien an das Gewebe zu verhindern. … Um die unspezifische Bindung abzumildern, sollte vor der Inkubation mit dem primären Antikörper ein Blockierungsschritt durchgeführt werden.

Wie löscht man die endogene Peroxidase-Aktivität?

Typische Methoden zum Quenchen der endogenen Peroxidase-Aktivität in Gewebeschnitten sind wie folgt: Stellen Sie die Peroxidase-Blockierungslösung her, indem Sie einen Teil 30 %iges Wasserstoffperoxid zu neun Teilen Methanol hinzufügen. Tauchen Sie die Objektträger 10 min lang in diese Lösung.

Wie stoppt man das endogene Biotin?

Dr. Rodney Miller hat auch Eiweiß als Quelle für Avidin und Magermilch als Quelle für Biotin verwendet, um endogenes Biotin erfolgreich zu blockieren, aber zum Spülen der Schnitte zwischen den Schritten sollte Wasser verwendet werden, da PBS ausfällt Proteine ​​im Eiweiß heraus.

Endogene Peroxidase-Blockierung im Gewebe mit Wasserstoffperoxid

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